纯化色谱系统的目的,是从混合物中得到高纯单组份,和剖析色谱不同,在选用活动相时,还要考虑后续溶剂去除等别离操作(旋蒸、冻干等方法)。一般来说,不宜采用高毒性溶剂,对多元溶剂要尽可能的少用,另溶剂的纯度也要考虑在其间。这儿小编介绍下制备色谱做别离纯化的活动相选择。
纯化色谱系统在制备纯化工艺中,想要准确、合理的确认活动相的流速规模,需求结合必定的理论基础和实践的纯化经历。为了使很多新接触制备纯化的用户能够更快、更好的对流速设定,姑苏林恩色谱科技向客户提供流速范围。关于非常规、比较难别离的样品就要依据别离情况进行恰当的流速调整才能成功达到别离要求。今日我们就从原理和纯化经历上讨论怎么找到合适的流速,更好的别离那些让人头痛的样品。
纯化色谱系统中的流速一般有两种表述方式,一种是体积流速,即单位时刻内流过某截面的流体的体积,单位mL/min,实践的别离过程中多用此来表明流体的速度;另一种就是线流速,即流体中任一质点在单位时刻内沿管路方向所经过的间隔,单位cm/min,该表明方式多用于理论剖析。一般,在别离纯化过程中应采用流速以期得到别离。线流速从根本上是由填料粒径和形状所决议,而体积流速可由线流速与柱子内径的截面积相乘而得到。二者之间可经过色谱柱的内径相互换算。
一般我们所以为的理论流速,是指能使色谱柱发挥出高柱效的流速,主要取决于柱子的内径以及所用填料的参数。经典的剖析柱的填料粒径为5um左右,由VanDeemter理论方程可核算出此时的线速度,再考虑到经典剖析柱的内径为4.6mm,则可以核算得出体积流速为1ml/min。因而,关于5um粒径的填料、4.6mm内径的色谱柱用于剖析或纯化小试的起始流速都设定为1ml/min。